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    Elisa实验中的洗涤步骤不可马虎

    发布时间: 2022-08-03  点击次数: 1206次

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    Elisa实验中的洗涤步骤不可马佰利莱生物来帮忙,在操作Elisa实验中,每一步都务必按照说明书进行操作,如有不清楚的地方,可咨询我公司,我司提供全程指导,购买我司ELisa试剂盒可提供代测服务。

    洗涤在Elisa过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。Elisa就是靠洗涤来达到分离离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,

    操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。

    洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20, 其浓度可在0. 05%-0. 2%之间,高于0. 2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附

    而减低试验的灵敏度。

    洗板时注意各种试剂盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀释,应按要求稀释,所用的水电导率在1. 5us/cm之下,洗液如果结晶应待其融解后配制。保证洗板浸泡时间为40秒左右,孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好,手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。


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